Amazonian soil fungi are efficient degraders of glyphosate herbicide; novel isolates of Penicillium, Aspergillus, and Trichoderma / Os fungos do solo amazônico são degradadores eficientes do herbicida glifosato; novos isolados de Penicillium, Aspergillus e Trichoderma

Pesticide residues that contaminate the environment circulate within the hydrological cycle can accumulate within the food chain and cause problems to both environmental and human health. Microbes, however, are well known for their metabolic versatility and the ability to degrade chemically stable substances, including recalcitrant xenobiotics. The current study focused on bio-prospecting within Amazonian rainforest soils to find novel strains fungi capable of efficiently degrading the agriculturally and environmentally ubiquitous herbicide, glyphosate. Of 50 fungal strains isolated (using culture media supplemented with glyphosate as the sole carbon-substrate), the majority were Penicillium strains (60%) and the others were Aspergillus and Trichoderma strains (26 and 8%, respectively). All 50 fungal isolates could use glyphosate as a phosphorous source. Eight of these isolates grew better on glyphosate-supplemented media than on regular Czapek Dox medium. LC-MS revealed that glyphosate degradation by Penicillium 4A21 resulted in sarcosine and aminomethylphosphonic acid.

Resíduos de agrotóxicos que contaminam o meio ambiente circulam no ciclo hidrológico, podendo se acumular na cadeia alimentar e causar problemas tanto à saúde ambiental quanto humana. Por sua vez, microrganismos são bem conhecidos por sua versatilidade metabólica e capacidade de degradar substâncias quimicamente estáveis, incluindo xenobióticos recalcitrantes. O estudo atual se concentrou na bioprospecção nos solos da floresta amazônica para encontrar novas linhagens de fungos capazes de degradar com eficiência o herbicida onipresente na agricultura e no meio ambiente, o glifosato. Entre os 50 fungos isolados (usando meio de cultura suplementado com glifosato como única fonte de carbono), a maioria eram isolados do gênero Penicillium (60%) e os outros eram isolados de Aspergillus e Trichoderma (26 e 8%, respectivamente). Todos os 50 isolados de fungos foram capazes de usar glifosato como fonte de fósforo. Oito desses isolados cresceram melhor em meio suplementado com glifosato do que em meio Czapek Dox regular. LC-MS revelou que a degradação do glifosato por Penicillium 4A21 resultou nos metabólitos sarcosina e ácido aminometilfosfônico.

Amazonian soil fungi are efficient degraders of glyphosate herbicide; novel isolates of Penicillium, Aspergillus, and Trichoderma

Abstract Pesticide residues that contaminate the environment circulate within the hydrological cycle can accumulate within the food chain and cause problems to both environmental and human health. Microbes, however, are well known for their metabolic versatility and the ability to degrade chemically stable substances, including recalcitrant xenobiotics. The current study focused on bio-prospecting within Amazonian rainforest soils to find novel strains fungi capable of efficiently degrading the agriculturally and environmentally ubiquitous herbicide, glyphosate. Of 50 fungal strains isolated (using culture media supplemented with glyphosate as the sole carbon-substrate), the majority were Penicillium strains (60%) and the others were Aspergillus and Trichoderma strains (26 and 8%, respectively). All 50 fungal isolates could use glyphosate as a phosphorous source. Eight of these isolates grew better on glyphosate-supplemented media than on regular Czapek Dox medium. LC-MS revealed that glyphosate degradation by Penicillium 4A21 resulted in sarcosine and aminomethylphosphonic acid.

Resumo Resíduos de agrotóxicos que contaminam o meio ambiente circulam no ciclo hidrológico, podendo se acumular na cadeia alimentar e causar problemas tanto à saúde ambiental quanto humana. Por sua vez, microrganismos são bem conhecidos por sua versatilidade metabólica e capacidade de degradar substâncias quimicamente estáveis, incluindo xenobióticos recalcitrantes. O estudo atual se concentrou na bioprospecção nos solos da floresta amazônica para encontrar novas linhagens de fungos capazes de degradar com eficiência o herbicida onipresente na agricultura e no meio ambiente, o glifosato. Entre os 50 fungos isolados (usando meio de cultura suplementado com glifosato como única fonte de carbono), a maioria eram isolados do gênero Penicillium (60%) e os outros eram isolados de Aspergillus e Trichoderma (26 e 8%, respectivamente). Todos os 50 isolados de fungos foram capazes de usar glifosato como fonte de fósforo. Oito desses isolados cresceram melhor em meio suplementado com glifosato do que em meio Czapek Dox regular. LC-MS revelou que a degradação do glifosato por Penicillium 4A21 resultou nos metabólitos sarcosina e ácido aminometilfosfônico.

Amazonian soil fungi are efficient degraders of glyphosate herbicide; novel isolates of Penicillium, Aspergillus, and Trichoderma / Os fungos do solo amazônico são degradadores eficientes do herbicida glifosato; novos isolados de Penicillium, Aspergillus e Trichoderma

Abstract Pesticide residues that contaminate the environment circulate within the hydrological cycle can accumulate within the food chain and cause problems to both environmental and human health. Microbes, however, are well known for their metabolic versatility and the ability to degrade chemically stable substances, including recalcitrant xenobiotics. The current study focused on bio-prospecting within Amazonian rainforest soils to find novel strains fungi capable of efficiently degrading the agriculturally and environmentally ubiquitous herbicide, glyphosate. Of 50 fungal strains isolated (using culture media supplemented with glyphosate as the sole carbon-substrate), the majority were Penicillium strains (60%) and the others were Aspergillus and Trichoderma strains (26 and 8%, respectively). All 50 fungal isolates could use glyphosate as a phosphorous source. Eight of these isolates grew better on glyphosate-supplemented media than on regular Czapek Dox medium. LC-MS revealed that glyphosate degradation by Penicillium 4A21 resulted in sarcosine and aminomethylphosphonic acid.

Resumo Resíduos de agrotóxicos que contaminam o meio ambiente circulam no ciclo hidrológico, podendo se acumular na cadeia alimentar e causar problemas tanto à saúde ambiental quanto humana. Por sua vez, microrganismos são bem conhecidos por sua versatilidade metabólica e capacidade de degradar substâncias quimicamente estáveis, incluindo xenobióticos recalcitrantes. O estudo atual se concentrou na bioprospecção nos solos da floresta amazônica para encontrar novas linhagens de fungos capazes de degradar com eficiência o herbicida onipresente na agricultura e no meio ambiente, o glifosato. Entre os 50 fungos isolados (usando meio de cultura suplementado com glifosato como única fonte de carbono), a maioria eram isolados do gênero Penicillium (60%) e os outros eram isolados de Aspergillus e Trichoderma (26 e 8%, respectivamente). Todos os 50 isolados de fungos foram capazes de usar glifosato como fonte de fósforo. Oito desses isolados cresceram melhor em meio suplementado com glifosato do que em meio Czapek Dox regular. LC-MS revelou que a degradação do glifosato por Penicillium 4A21 resultou nos metabólitos sarcosina e ácido aminometilfosfônico.

Application of the pulmonary embolism rule-out criteria (PERC rule) and age-adjusted D-Dimer in patients undergoing computed tomography pulmonary angiography for diagnosis of pulmonary embolism / Aplicação dos critérios PERC e do D-Dímero ajustado para idade em pacientes submetidos a angiotomografia pulmonar para o diagnóstico de embolia pulmonar

Abstract Background Diagnosis of pulmonary embolism (PE) constitutes a challenge for practitioners. Current practice involves use of pre-test probability prediction rules. Several strategies to optimize this process have been explored. Objectives To explore whether application of the pulmonary embolism rule-out criteria (PERC rule) and age-adjusted D-dimer (DD) would have reduced the number of computed tomography pulmonary angiography (CTPA) examinations performed in patients with suspected PE. Methods A retrospective cross-sectional study of adult patients taken for CTPA under suspicion of PE in 2018 and 2020. The PERC rule and age-adjusted DD were applied. The number of cases without indications for imaging studies was estimated and the operational characteristics for diagnosis of PE were calculated. Results 302 patients were included. PE was diagnosed in 29.8%. Only 27.2% of 'not probable' cases according to the Wells criteria had D-dimer assays. Age adjustment would have reduced tomography use by 11.1%, with an AUC of 0.5. The PERC rule would have reduced use by 7%, with an AUC of 0.72. Conclusions Application of age-adjusted D-dimer and the PERC rule to patients taken for CTPA because of suspected PE seems to reduce the number of indications for the procedure.

Resumo Contexto O diagnóstico de embolia pulmonar (EP) representa um desafio para o profissional. A prática atual envolve o uso de modelos de previsão de probabilidade pré-teste e, para otimizar esse processo, várias estratégias têm sido exploradas. Objetivos Investigar se a aplicação dos critérios de exclusão de EP (pulmonary embolism rule-out criteria, PERC) e do D-dímero (DD) ajustado para idade diminui o número de angiografias computadorizadas (ATCs) pulmonares realizadas em pacientes com suspeita de EP. Métodos Estudo transversal retrospectivo com pacientes adultos submetidos a ATC pulmonar com suspeita de EP em 2018 e 2020. Foram aplicados os critérios PERC e o DD ajustado para idade. Foi estimado o número de casos não indicados para exames de imagem, e foram calculadas as características operacionais para o diagnóstico de EP. Resultados Foram incluídos 302 pacientes, dos quais 29,8% apresentaram diagnóstico de EP. Apenas 27,2% dos casos não prováveis ​​de acordo com os critérios de Wells apresentaram DD; o ajuste implicou em uma diminuição de ACTs de 11,1%, com área sob a curva de 0,5. Os critérios PERC diminuiriam em 7%, com área sob a curva de 0,72. Conclusões A aplicação do DD ajustado para idade e dos critérios PERC em pacientes submetidos a ATC pulmonar por suspeita de EP parece diminuir a indicação para tais exames.

Correspondência de teor de dissulfeto de captopril com odor de enxofre em comprimidos de captopril 25 mg, provenientes de farmácias públicas (postos de saúde) e drogarias comerciais / Correspondence of captopril disulfide content with sulfur odor in 25 mg captopril tablets from public pharmacies (health clinics) and commercial drugstores

Introdução: O captopril (CP) é o medicamento de escolha para o tratamento da hipertensão arterial. Sua degradação leva à formação do dímero dissulfeto de captopril (DSCP), este associado a um odor forte no medicamento, podendo causar abandono do tratamento pelo paciente. Objetivo: Determinar DCSP, associar a percepção olfativa de odor de enxofre desprendido do produto e realizar a avaliação de bula de comprimidos de captopril 25 mg distribuídos pelos setores público e privado. Método: Foi verificado o desempenho do método de determinação do CP e DSCP pela Farmacopeia Brasileira 6a ed. por HPLC (DAD). Foram analisados 13 produtos de comprimidos de captopril 25 mg, sendo dois provenientes do setor público de lotes diferentes e mesmo fabricante e 11 do setor privado de diferentes fabricantes e lotes. Foram avaliados aspectos do comprimido quanto à percepção de odor, determinação de peso, identificação e teor de CP e de DSCP e análise do conteúdo da bula. Resultados: Dentre os 13, o medicamento vencido apresentou 4,4% de DSCP, os demais estavam de acordo com a especificação. Verificouse  correspondência do odor de enxofre perceptível com teor de DSCP acima de 0,5%. Considerando os textos de bula sobre odor de enxofre, as constatações foram: nenhuma informação (três produtos), odor característico (dois), leve odor de enxofre (um), leve odor de enxofre sem diminuir a eficácia (sete). Conclusões: As amostras apresentaram resultados satisfatórios para os ensaios realizados. Verificou-se falta de homogeneidade nas informações das bulas sobre o odor dos comprimidos. A percepção do paciente quanto ao odor de enxofre, mesmo dentro do limite tolerado de DSCP, pode levar a não aceitação do medicamento e consequente não adesão ao tratamento da hipertensão, além de gerar prejuízos ao SUS.

Introduction: Captopril (CP) is the drug of choice for the treatment of hypertension. Its degradation leads to the formation of captopril disulfide dimer (DSCP), associated with a strong odor in the drug, which can cause the patient abandonment of treatment. Objective: To determine DCSP, associate the olfactory perception of the sulfur odor given off by the product and carry out the evaluation of the package insert for captopril 25 mg tablets distributed in the public and private sectors. Method: The performance of CP and DSCP determination method of the Brazilian Pharmacopoeia 6 ed was verified by HPLC (DAD). Thirteen products of 25 mg captopril tablets were analyzed, 2 of which came from the public sector from different batches and the same manufacturer: the other 11 came from the private sector from different batches and manufacturers. The samples were analyzed regarding appearance, odor perception, identification, weight determination, CP and DSCP content (by HPLC) and package insert content. Results: Among the 13, the expired drug had 4.4% DSCP; the others were in accordance with the specification. Correspondence of perceptible sulfur odor was established for drugs with DSCP content above 0.5%. Considering the texts on sulfur odor in the package inserts, the findings were: none information (3 products), characteristic odor (2), slight sulfur odor (1), slight sulfur odor without decreasing effectiveness (7). Conclusions: The samples showed satisfactory results for the tests performed. There was a lack of homogeneity in the information in the package inserts about odor of the tablets. The patient's perception of sulfur odor, even within the tolerated limit of DSCP, can lead to non-acceptance of the drug and consequent non- adherence to the treatment of hypertension, in addition to causing damage to the SUS.

Biodegradation of petroleum by bacteria isolated from fishes of Indian Ocean / Biodegradação do petróleo por bactérias isoladas de peixes do oceano Índico

In this study, oil degrading bacteria discovered from fish living near the oil ports at Karachi in Pakistan were characterized. The bacteria isolated from skin, gills, and gut in fish could consume crude oil as a source of carbon and energy. Total 36 isolates were tested using Nutrient Agar (NA) and MSA media with different crude oil concentrations (0.2%, 0.5%, 0.7%, 1%, 2%, and 5%) and 4 out of 36 isolates (two Gram positive and two Gram negative bacteria) were selected for further identification. 16S rRNA gene sequencing revealed that the isolates are related to Bacillus velezensis, Bacillus flexus, Pseudomonas brenneri and Pseudomonas azotoforman. Oil degrading potential of these bacteria was characterized by GC-MS analysis of degradation of oil components in crude oil as well as engine oil. We found that one (2, 6, 10, 14-Tetramethylpentadecane) out of 42 components in the crude oil was fully eliminated and the other oil components were reduced. In addition, 26 out of 42 oil components in the engine oil, were fully eliminated and the rest were amended. Taken together, these studies identify that B. velezensis, B. flexus, P. brenneri and P. azotoforman have high oil degrading potential, which may be useful for degradation of oil pollutants and other commercial applications.

Neste estudo, bactérias degradadoras de óleo descobertas em peixes que vivem perto dos portos de petróleo em Karachi, no Paquistão, foram caracterizadas. As bactérias isoladas da pele, guelras e intestinos dos peixes podem consumir petróleo bruto como fonte de carbono e energia. No total, 36 isolados foram testados usando Agar Nutriente (NA) e meio MSA com diferentes concentrações de óleo bruto (0,2%, 0,5%, 0,7%, 1%, 2% e 5%) e 4 de 36 isolados (dois Gram positivos e duas bactérias Gram negativas) foram selecionadas para posterior identificação. O sequenciamento do gene 16S rRNA revelou que os isolados estão relacionados a Bacillus velezensis, Bacillus flexus, Pseudomonas brenneri e Pseudomonas azotoforman. O potencial de degradação do óleo dessas bactérias foi caracterizado pela análise de GC-MS da degradação dos componentes do óleo no óleo cru, bem como no óleo do motor. Descobrimos que um (2, 6, 10, 14-tetrametilpentadecano) de 42 componentes do óleo cru foi totalmente eliminado e os outros componentes do óleo foram reduzidos. Além disso, 26 dos 42 componentes do óleo do motor foram totalmente eliminados e o restante corrigido. Juntos, esses estudos identificam que B. velezensis, B. flexus, P. brenneri e P. azotoforman têm alto potencial de degradação de óleo, o que pode ser útil para a degradação de poluentes de óleo e outras aplicações comerciais.

Biodegradation of petroleum by bacteria isolated from fishes of Indian Ocean

Abstract In this study, oil degrading bacteria discovered from fish living near the oil ports at Karachi in Pakistan were characterized. The bacteria isolated from skin, gills, and gut in fish could consume crude oil as a source of carbon and energy. Total 36 isolates were tested using Nutrient Agar (NA) and MSA media with different crude oil concentrations (0.2%, 0.5%, 0.7%, 1%, 2%, and 5%) and 4 out of 36 isolates (two Gram positive and two Gram negative bacteria) were selected for further identification. 16S rRNA gene sequencing revealed that the isolates are related to Bacillus velezensis, Bacillus flexus, Pseudomonas brenneri and Pseudomonas azotoforman. Oil degrading potential of these bacteria was characterized by GC-MS analysis of degradation of oil components in crude oil as well as engine oil. We found that one (2, 6, 10, 14-Tetramethylpentadecane) out of 42 components in the crude oil was fully eliminated and the other oil components were reduced. In addition, 26 out of 42 oil components in the engine oil, were fully eliminated and the rest were amended. Taken together, these studies identify that B. velezensis, B. flexus, P. brenneri and P. azotoforman have high oil degrading potential, which may be useful for degradation of oil pollutants and other commercial applications.

Resumo Neste estudo, bactérias degradadoras de óleo descobertas em peixes que vivem perto dos portos de petróleo em Karachi, no Paquistão, foram caracterizadas. As bactérias isoladas da pele, guelras e intestinos dos peixes podem consumir petróleo bruto como fonte de carbono e energia. No total, 36 isolados foram testados usando Agar Nutriente (NA) e meio MSA com diferentes concentrações de óleo bruto (0,2%, 0,5%, 0,7%, 1%, 2% e 5%) e 4 de 36 isolados (dois Gram positivos e duas bactérias Gram negativas) foram selecionadas para posterior identificação. O sequenciamento do gene 16S rRNA revelou que os isolados estão relacionados a Bacillus velezensis, Bacillus flexus, Pseudomonas brenneri e Pseudomonas azotoforman. O potencial de degradação do óleo dessas bactérias foi caracterizado pela análise de GC-MS da degradação dos componentes do óleo no óleo cru, bem como no óleo do motor. Descobrimos que um (2, 6, 10, 14-tetrametilpentadecano) de 42 componentes do óleo cru foi totalmente eliminado e os outros componentes do óleo foram reduzidos. Além disso, 26 dos 42 componentes do óleo do motor foram totalmente eliminados e o restante corrigido. Juntos, esses estudos identificam que B. velezensis, B. flexus, P. brenneri e P. azotoforman têm alto potencial de degradação de óleo, o que pode ser útil para a degradação de poluentes de óleo e outras aplicações comerciais.

Biodegradation of petroleum by bacteria isolated from fishes of Indian Ocean / Biodegradação do petróleo por bactérias isoladas de peixes do oceano Índico

In this study, oil degrading bacteria discovered from fish living near the oil ports at Karachi in Pakistan were characterized. The bacteria isolated from skin, gills, and gut in fish could consume crude oil as a source of carbon and energy. Total 36 isolates were tested using Nutrient Agar (NA) and MSA media with different crude oil concentrations (0.2%, 0.5%, 0.7%, 1%, 2%, and 5%) and 4 out of 36 isolates (two Gram positive and two Gram negative bacteria) were selected for further identification. 16S rRNA gene sequencing revealed that the isolates are related to Bacillus velezensis, Bacillus flexus, Pseudomonas brenneri and Pseudomonas azotoforman. Oil degrading potential of these bacteria was characterized by GC-MS analysis of degradation of oil components in crude oil as well as engine oil. We found that one (2, 6, 10, 14-Tetramethylpentadecane) out of 42 components in the crude oil was fully eliminated and the other oil components were reduced. In addition, 26 out of 42 oil components in the engine oil, were fully eliminated and the rest were amended. Taken together, these studies identify that B. velezensis, B. flexus, P. brenneri and P. azotoforman have high oil degrading potential, which may be useful for degradation of oil pollutants and other commercial applications.

Neste estudo, bactérias degradadoras de óleo descobertas em peixes que vivem perto dos portos de petróleo em Karachi, no Paquistão, foram caracterizadas. As bactérias isoladas da pele, guelras e intestinos dos peixes podem consumir petróleo bruto como fonte de carbono e energia. No total, 36 isolados foram testados usando Agar Nutriente (NA) e meio MSA com diferentes concentrações de óleo bruto (0,2%, 0,5%, 0,7%, 1%, 2% e 5%) e 4 de 36 isolados (dois Gram positivos e duas bactérias Gram negativas) foram selecionadas para posterior identificação. O sequenciamento do gene 16S rRNA revelou que os isolados estão relacionados a Bacillus velezensis, Bacillus flexus, Pseudomonas brenneri e Pseudomonas azotoforman. O potencial de degradação do óleo dessas bactérias foi caracterizado pela análise de GC-MS da degradação dos componentes do óleo no óleo cru, bem como no óleo do motor. Descobrimos que um (2, 6, 10, 14-tetrametilpentadecano) de 42 componentes do óleo cru foi totalmente eliminado e os outros componentes do óleo foram reduzidos. Além disso, 26 dos 42 componentes do óleo do motor foram totalmente eliminados e o restante corrigido. Juntos, esses estudos identificam que B. velezensis, B. flexus, P. brenneri e P. azotoforman têm alto potencial de degradação de óleo, o que pode ser útil para a degradação de poluentes de óleo e outras aplicações comerciais.

Aplicação da eletroforese capilar - espectrometria de massas para identificação dos produtos de degradação do aripiprazol em medicamentos / Application of capillary electrophoresis - mass spectrometry to identify aripiprazole degradation products in drugs

Diretrizes internacionais e nacionais como a FDA (Food and Drug Administration), ICH (International Council for Harmonisation) e ANVISA (Agência Nacional de Vigilância Sanitária) estabelecem a exigência de testes de estabilidade para entender melhor a qualidade de um medicamento. O estudo de estabilidade deve ser realizado usando métodos indicativos de estabilidade que possam qualificar e quantificar os insumos farmacêuticos do medicamento, bem como as impurezas e produtos de degradação nele contidos. O aripiprazol é um antipsicótico atípico de segunda geração aprovado para o tratamento de esquizofrenia, transtorno bipolar, depressão e transtornos do espectro do autismo. Os métodos oficiais descritos nas farmacopeias para avaliar o aripiprazol e suas impurezas utilizam a cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) como técnica principal. Nesta pesquisa, objetivou-se desenvolver um método indicativo de estabilidade por eletroforese capilar de zona (CZE) para o aripiprazol na forma farmacêutica de comprimidos, e identificação dos produtos de degradação por espectrometria de massas. O estudo de degradação forçada e a optimização do método desenvolvido por CZE foram realizados utilizando o conceito de delineamento de experimentos (DoE). A separação do aripiprazol de seus produtos de degradação foi conseguida usando uma coluna capilar de sílica fundida (30,2 cm x 75 µm ID), eletrólito de formiato de amônio 6 mmol/L (pH 3) com 5% de metanol sob um potencial de 15 kV e detecção em 214 nm. A capacidade indicativa de estabilidade do método foi investigada pela análise do aripiprazol após ser submetido a condições de estresse ácido, alcalino, térmico, fotolítico e oxidativo, de acordo com as diretrizes ICH. A oxidação foi a principal via de degradação entre as condições de estresse avaliadas. O aripiprazol foi separado dos seus produtos de degradação oxidativa em tempo de corrida abaixo de 5 minutos. O método por CZE mostrou ser linear na faixa de 60 - 140 µg/mL, R2 = 0,9980, precisão calculada como desvio padrão relativo (DPR) menor que 2% e exatidão calculada como recuperação média de 100,93 ± 0,77%. Os resultados obtidos demonstram que o método por HPLC-RP em modo gradiente, separou o aripiprazol e seus produtos de degradação em um tempo de corrida de 30 minutos. Quatro produtos de degradação foram detectados pelo método LC-MS e o principal produto de degradação oxidativo foi identificado. O aripiprazol mostrou-se suscetível à oxidação no grupo piperazina, gerando principalmente o composto aripiprazol-1-N-óxido

International and national guidelines such as the FDA (Food and Drug Administration), ICH (International Council for Harmonization) and ANVISA (National Health Surveillance Agency) establish the requirement for stability tests to better understand quality of a medicine. The stability study must be carried out using stability indicating methods that can qualify and quantify the pharmaceutical ingredients of the drug, as well as the impurities and degradation products contained therein. Aripiprazole is a second-generation atypic antipsychotic drug approved for the treatment of schizophrenia, bipolar disorder, depression, and autism spectrum disorders. The official method described in the pharmacopoeias to evaluate aripiprazole and its impurities is high performance liquid chromatography (HPLC) as the main technique. In this research, the objective was to develop an indicative method of stability by capillary zone electrophoresis (CZE) for aripiprazole in the pharmaceutical form of tablets, and identification of degradation products by mass spectrometry. The forced degradation study and the optimization of the method developed by CZE were carried out using the concept of design of experiments (DoE). The separation of aripiprazole from its degradation products was achieved using a fused silica capillary column (30,2 cm x 75 µm ID), 6 mmol/L ammonium formate electrolyte (pH 3) with 5% methanol under a potential of 15 kV and detection at 214 nm. The indicative stability of the method was investigated by analyzing aripiprazole after being subjected to acid, alkali, thermal, photolytic and oxidative stress conditions, according to the ICH guidelines. Oxidation was the main degradation pathway among the stress conditions evaluated. Aripiprazole was separated from its oxidative degradation products at run times below 5 minutes. The CZE method proved to be linear in the range of 60 - 140 µg/mL, R2 = 0,9980, precision calculated as a relative standard deviation (DPR) of less than 2% and accuracy calculated as a mean recovery of 100,93 ± 0,77%. The results obtained demonstrate that the HPLC-RP method in gradient mode separated aripiprazole and its degradation products in a run time of 30 minutes. Four degradation products were detected by the LC-MS method and the main oxidative degradation product was identified. Aripiprazole was shown to be susceptible to oxidation in the piperazine group, generating mainly the compound aripiprazole-1-N-oxide

Dinâmica temporal da qualidade da água em um córrego urbano / Temporal dynamics of water quality in an urban stream

RESUMO A urbanização conduz ao acréscimo de superfícies de baixa permeabilidade nas bacias hidrográficas, o que resulta em aumento no volume de água pluvial escoado superficialmente nos terrenos e, consequentemente, na ampliação de poluentes carreados aos cursos de água receptores, o que pode prejudicar a qualidade de suas águas. O objetivo principal da presente pesquisa foi analisar a variação da qualidade da água ao longo do dia em um córrego impactado por área urbana por meio do índice de qualidade das águas (IQACETESB) e dos parâmetros envolvidos no seu cálculo. A coleta de amostras foi realizada uma vez ao mês, durante o período de sete meses, nos seguintes horários: 8h, 14h e 19h. No geral, foram encontradas baixas concentrações de oxigênio dissolvido e altos teores de matéria orgânica e nutrientes no córrego avaliado. A amostragem em diferentes períodos do dia foi eficiente em relação ao entendimento dos processos antrópicos que acontecem na sub-bacia estudada (e.g., lançamento de esgoto doméstico in natura e aporte intenso de fósforo no período da manhã). Além disso, foi observada uma oscilação significativa no valor do IQACETESB entre os três períodos do dia, tal como em junho de 2018: 52 (manhã) e 23 (noite). Dessa forma, a avaliação do IQACETESB conduzida em apenas um horário do dia pode deixar passar informações essenciais para os gestores ambientais, resultando em uma visão errônea do problema.

ABSTRACT Urbanization leads to the addition of areas of low permeability in watersheds, which results in an increase in the volume of rainwater drained superficially and, consequently, in the expansion of pollutants carried to the receiving watercourses, which may impair the quality of their waters. The main objective of this research was to analyze the variation in water quality throughout the day in a stream impacted by urban areas through the water quality index (WQICETESB) and the parameters involved in its calculation. Sample collection was performed once a month, for a period of seven months, at the following times: 8:00 am, 2:00 pm, and 7:00 pm. In general, low concentrations of dissolved oxygen and high levels of organic matter and nutrients were found in the stream evaluated. Sampling at different times of the day was efficient in terms of understanding the anthropic processes that take place in the studied sub-basin (e.g., the release of fresh domestic sewage and intense phosphorus input in the morning). In addition, a significant fluctuation in the value of the WQICETESB was observed between the three periods of the day, as in June 2018: 52 (morning) and 23 (night). Thus, the evaluation of the WQICETESB conducted in only one hour of the day can pass on essential information for environmental managers, resulting in an erroneous view of the problem.

Biodegradação do herbicida atrazina por Saccharomyces cerevisiae / Biodegradation of the atrazine herbicide by Saccharomyces cerevisiae

RESUMO Tendo em vista os vários problemas ambientais e de saúde que o uso crescente de agrotóxicos vem causando, é necessário a otimização de técnicas que visem a sua rápida degradação. A atrazina é um herbicida utilizado no controle de ervas daninhas, principalmente nas culturas de milho e cana-de-açúcar. Nesse sentido, o objetivo deste estudo foi verificar a eficiência da levedura Saccharomyces cerevisiae na degradação do herbicida atrazina em solo contaminado com diferentes concentrações do produto comercial. Foi igualmente testado o efeito da adição de palha de milho no experimento. A fim de determinar a quantidade de gás carbônico (CO2) liberado durante os ensaios, o qual reflete a atividade da microbiota do solo responsável pela degradação de compostos orgânicos, foi utilizada a técnica da respiração basal do solo. E, paralelamente a isso, para verificar a concentração de atrazina ao longo do experimento (tempo inicial, aos 7, 14 e 63 dias), foi utilizada a análise de cromatografia gasosa acoplada ao espectrômetro de massas (CG-MS). Por meio da análise estatística dos dados de respiração basal do solo, o fator de bioaumento com a levedura foi o mais significativo, seguido da adição de palha de milho. Verificou-se o declínio da concentração de atrazina por intermédio das análises cromatográficas. Assim, sugere-se que a biorremediação com S. cerevisiae tem potencial para elevar as taxas de degradação do herbicida no solo.

ABSTRACT Considering the various environmental and health problems that the increasing use of pesticides has been causing, it is necessary to optimize techniques aimed at their rapid degradation. Atrazine is a herbicide used to control weeds, especially in maize and sugarcane crops. Thus, the objective of this study was to verify the efficiency of the Saccharomyces cerevisiae yeast in the degradation of the herbicide atrazine in soil contaminated with different concentrations of the commercial product. The effect of addition of corn straw on the experiment was also tested. In order to determine the amount of carbon dioxide (CO2) released during the tests, which reflects the activity of the soil microorganism responsible for the degradation of organic compounds, the soil basal respiration technique was used. At the same time, the concentration of atrazine during the experiment (start time, at 7, 14, and 63 days) was analyzed by gas chromatography coupled to the mass spectrometer (CG-MS). Through the statistical analysis of the basal respiration data of the soil, the bioaugmentation factor with yeast was the most significant, followed by the addition of corn straw, and the decline in atrazine concentration was verified through chromatographic analyses. Thus, it is suggested that bioremediation with S. cerevisiae has the potential to increase the rates of degradation of the herbicide in the soil.

Luliconazole: Stability-indicating LC method, structural elucidation of major degradation product by HRMS and in silico studies / Luliconazol: método por LC indicativo de estabilidad, elucidación estructural del producto de degradación mayoritario por HRMS y estudios in silico / Luliconazol: método LC indicativo de estabilidade, elucidação estrutural do principal produto de degradação por HRMS e estudos in sílico

SUMMARY Aim: A new stability-indicating liquid chromatography method was developed and validated for the quantitative determination of luliconazole. Materials and methods: Preliminary forced degradation study demonstrated an additional peak of the degradation product at the same retention time to the drug, due to this, the method was developed optimizing the chromatographic conditions to provide sufficient peak resolution (R ≥ 2). The experimental design was evaluated to assess the robustness and the best chromatographic conditions to be used for the validation. Methodology: Luliconazole solutions were exposed to various stress conditions to evaluate the method indication stability, in which the degradation product (DP-1) formed was isolated, identified, and evaluated in silico to predict degradation pathway and toxicity. The procedure was validated by robustness, selectivity, linearity, precision, and accuracy. Liquid chromatography was performed in a Phenomenex® RP-18 column with a mixture of acetonitrile and 0.3% (v/v) triethylamine solution as a mobile phase in isocratic elution. Results and conclusions: The method demonstrated robustness, good recovery, precision, linear response over a range from 5.0 to 40.0 μg.mL-1- and to be stability indicating. The alkaline stress condition resulted in the formation of DP-1. HRMS studies identified this product as an hydroxyacetamide derivative, and in silico studies did not show toxic potential.

RESUMEN Objetivo: Un nuevo método indicativo de estabilidad por cromatografía líquida fue desarrollado y validado para la determinación cuantitativa de luliconazol. Materiales y métodos: Estudios preliminares de degradación forzada demostraron un pico adicional en el mismo tiempo de retención del fármaco. El método desarrollado para optimizar las condiciones cromatográicas proporcionó una adecuada resolución (R ≥ 2). El diseño experimental fue evaluado para verificar su robustez y la mejor condición cromatográica para validación. Metodología: Las soluciones de luliconazol fueron expuestas a diferentes condiciones de estrés para evaluar la indicación de estabilidad del método, el aislamiento del producto de degradación formado (DP-1), su identificación y análisis in silico para predecir su ruta de degradación y toxicidad. El procedimiento se validó por robustez, selectividad, linealidad, precisión y exactitud. Las condiciones cromatográficas incluyeron una columna Phenomenex® RP-18, como fase móvil una mezcla de acetonitrilo y solución 0,3% (v/v) de trietilamina en elución isocrática. Resultados y conclusiones: El método mostró ser robusto, con buena recuperación, precisión, respuesta lineal en el rango de 5,0 a 40,0 μg.mL-1 e indicativo de la estabilidad. La condición de estrés alcalina resultó en la formación de DP-1. Estudios por HRMS identificaron este producto como un derivado hidroxiacetamida y los estudios in silico no mostraron potencial de toxicidad.

RESUMO Objetivo: Um novo método indicativo de estabilidade por cromatograia líquida foi desenvolvido e validado para a determinação quantitativa de luliconazol. Materiais e métodos: Estudos preliminares de degradação forçada demonstraram um pico adicional no mesmo tempo de retenção do medicamento. O método desenvolvido para otimizar as condições cromatográficas proporcionou resolução adequada (R ≥ 2). O delineamento experimental foi avaliado para verificar sua robustez e a melhor condição cromatográica para validação. Metodologia: Soluções de luliconazol foram expostas a diferentes condições de estresse para avaliar a indicação da estabilidade do método, o isolamento do produto de degradação formado (DP-1), sua identificação e análise in silico para predizer sua rota de degradação e toxicidade. O procedimento foi validado quanto à robustez, seletividade, linearidade, precisão e exatidão. As condições cromatográficas incluíram uma coluna Phenomenex® RP-18, como fase móvel uma mistura de acetonitrila e solução de trietilamina 0,3% (v/v) em eluição isocrática. Resultados e conclusões: O método mostrou-se robusto, com boa recuperação, precisão, resposta linear na faixa de 5,0 a 40,0 μg.mL-1 e indicativo de estabilidade. A condição de estresse alcalino resultou na formação de DP-1. Os estudos da HRMS identificaram este produto como um derivado da hidroxiacetamida e os estudos in silico não mostraram nenhum potencial de toxicidade.

Uso da cafeína como indicador de poluição por esgoto doméstico em corpos d'água urbanos / Use of caffeine as an indicator of pollution by domestic sewage in urban water bodies

RESUMO Nos centros populacionais, os ambientes aquáticos estão em constante degradação em consequência das atividades desenvolvidas nas bacias de drenagem, sendo o despejo de esgoto doméstico uma das maiores fontes de poluição. Monitoramentos ambientais de qualidade da água refletem os poluentes gerados nas áreas de influência e dão indícios das prováveis origens. Todavia, são as substâncias de uso exclusivamente antrópico que podem comprovar a existência do lançamento de tais cargas poluidoras. Nesse contexto, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a eficiência da cafeína como indicador de poluição por esgoto doméstico. O método analítico utilizado para a sua identificação foi a cromatografia líquida de alta eficiência. Com o intuito de relacionar os resultados obtidos para a cafeína com a diluição e as fontes difusas de poluição, foram aferidos, ainda, dados de precipitação, oxigênio dissolvido e demanda bioquímica de oxigênio. A cafeína foi encontrada em todas as amostras analisadas, com concentrações variando de 0,01 a 7,80 mg.L−1. Os maiores valores foram observados no período chuvoso, relacionados ao transbordamento e ao vazamento de esgoto doméstico. Este estudo inferiu a utilização da cafeína como eficiente indicador de poluição por esgoto doméstico.

ABSTRACT In population centers, aquatic environments are in constant degradation due to the activities carried out in watersheds, with the release of domestic sewage being one of the biggest sources of pollution. Environmental monitoring of water quality reflects the inputs generated in the areas of influence and gives evidence of likely origins. However, it is the substances for exclusively anthropic use that can prove the existence of the release of such polluting loads. In this context, the present study aimed to evaluate the efficiency of caffeine as an indicator of pollution by domestic sewage. The analytical method used for its identification was high-performance liquid chromatography (HPLC). In order to relate the results obtained for caffeine with the dilution and nonpoint sources pollution, data on precipitation, dissolved oxygen, and biochemical oxygen demand were also measured. Caffeine was found in all samples analyzed, with concentrations ranging from 0.01 to 7.80 mg.L−1. The highest values were observed in the rainy season, related to the overflow and leakage of domestic sewage. This study infered the use of caffeine as an efficient indicator of pollution by domestic sewage.

Rumen degradation kinetics of coffee hulls treated with calcium oxide under aerobic or anaerobic conditions / Cinética de degradación ruminal de la cascarilla de café tratada con óxido de calcio en condiciones de aerobiosis o anaerobiosis / Cinética de degradação ruminal da casca de café tratada com óxido de cálcio em condição de aerobiose ou anaerobiose

Abstract Background: Coffee hulls obtained from dry processing, have the potential to be used in ruminant diets. Objective: To evaluate the chemical composition and in situ degradability of dry matter (DM) and neutral detergent fiber (NDF) of coffee hulls treated with calcium oxide (CaO) in different environmental conditions (EC). Methods: Coffee hulls were subjected to treatments distributed in a 2 × 2 factorial arrangement, consisting of two levels of CaO (0 and 5%, on a DM basis) and two environmental conditions (aerobiosis and anaerobiosis) in a completely randomized design with four replicates, totaling sixteen experimental units. Five-gram samples were incubated in the rumen of two male cattle for 0, 3, 6, 9, 12, 24, 48, 72, 96, and 120 h. Results: Regarding dry matter degradation kinetic parameters, except for fraction b, the potential and effective degradability was affected (p<0.05) by a CaO × EC interaction. As for estimated fiber degradation parameters, the potentially degradable fraction b was affected (p<0.05) by CaO and EC. Treatment with CaO increased fraction b in 4.08 percentage points. Conclusions: The use of CaO in the treatment of coffee hulls increases the effective and potential degradability of DM and reduces the undegradable fiber fraction. Anaerobic condition is the best environment for the treatment of coffee hulls with CaO.

Resumen Antecedentes: la cáscara de café obtenida por procesamiento en seco presenta potencial de uso en la alimentación de rumiantes. Objetivo: Evaluar la composición química, la degradabilidad in situ de la materia seca (DM) y de la fibra detergente neutra (NDF) de la cascara de café tratada con óxido de calcio (CaO) en diferentes condiciones ambientales (EC). Métodos: la cáscara de café fue sometida a tratamientos distribuidos en un diseño factorial 2 x 2, dos dosis de CaO (0 a 5% en base seca), y dos condiciones ambientales (aeróbica y anaeróbica) en un diseño completamente al azar con cuatro repeticiones, totalizando dieciséis unidades experimentales. Las muestras de cinco gramos se incubaron en el rumen de dos bovinos machos durante 0, 3, 6, 9, 12, 24, 48, 72, 96 y 120 horas. Resultados: para los parámetros cinéticos de degradación de la DM, a excepción de la fracción b, la degradabilidad potencial y efectiva fueron afectadas (p<0,05) por la interacción CaO × EC. En cuanto a los parámetros estimados de la degradación de la fibra, la fracción potencialmente degradable b presentó efecto (p<0,05) para CaO y EC. El tratamiento con CaO promovió un aumento de la fracción b en 4,08 puntos porcentuales. Conclusión: la utilización del CaO para el tratamiento de la cáscara de café aumenta la degradabilidad efectiva y potencial de la DM y reducción de la fracción no degradable de la fibra. La condición de anaerobiosis se constituye en el mejor ambiente para el tratamiento de la cascara de café con CaO.

Resumo Antecedentes: cascas de café obtidas pelo processamento a seco têm potencial de serem usadas na alimentação de ruminantes. Objetivo: avaliar a composição química, a degradabilidade in situ da matéria seca (DM) e da fibra em detergente neutro (NDF) da casca de café tratada com óxido de cálcio (CaO) em diferentes condições de ambiente (EC). Métodos: a casca de café foi submetida aos tratamentos, distribuídos em esquema fatorial 2 × 2, sendo duas doses de CaO (0 e 5% base da matéria seca) e duas condições de ambiente (aeróbico e anaeróbico), em delineamento inteiramente casualizado, com quatro repetições, totalizando dezesseis unidades experimentais. Amostras de cinco gramas foram incubadas no rúmen de dois bovinos machos, nos tempos 0, 3, 6, 9, 12, 24, 48, 72, 96 e 120 horas. Resultados: para os parâmetros cinéticos de degradação da DM, à exceção da fração b, a degradabilidade potencial e efetiva foram afetados (p<0,05) pela interação CaO × EC. Quanto aos parâmetros estimados da degradação da fibra, a fração potencialmente degradável (b) apresentou efeito (p<0,05) para CaO e EC. O tratamento com CaO promoveu aumento da fração b em 4,08 pontos percentuais. Conclusões: a utilização do CaO no tratamento da casca de café promove aumento da degradabilidade efetiva e potencial da DM e redução da fração indegradável da fibra. A condição de anaerobiose constitui-se no melhor ambiente para o tratamento da casca de café com CaO.

Human impacts and the loss of Neotropical freshwater fish diversity

Neotropical Ichthyology promotes the Special Issue (SI) "Human impacts and the loss of Neotropical freshwater fish diversity" with the purpose of publishing relevant scientific articles on the current biodiversity crisis and the loss of Neotropical freshwater fishes in the Anthropocene. The SI is composed of 22 publications, being two review articles and 20 original articles. A total of 107 researchers contributed to these papers, involving 44 institutions based in Brazil and six other countries. Published articles investigated main anthropic activities and their impacts on fish diversity, with special focus on river regulation, mining, land use changes, aquaculture, and fisheries. Studies provided evidence about the loss of fish diversity in the Neotropics, including fish kill events, demographic changes, contamination, changes in assemblage structure, loss of taxonomic and functional diversity, besides the degradation of ecosystem functions and services, and the lack of effective protection and conservation. Studies were conducted in rivers, streams, lakes, and reservoirs from different Neotropical systems. The studies published in this SI represent a relevant sample of the current worrisome situation of freshwater fishes in the Neotropical region and call for urgent revision in environmental policies, management and conservation initiatives, and socioeconomic priorities.(AU)

A revista Neotropical Ichthyology lança o Volume Especial (SI) "Human impacts and the loss of Neotropical freshwater fish diversity" com o objetivo de publicar artigos científicos relevantes sobre a atual crise da biodiversidade e a perda de diversidade de peixes de água doce Neotropicais no Antropoceno. O SI é composto por 22 publicações, sendo dois artigos de revisão e 20 artigos originais. Um total de 107 pesquisadores contribuíram com esses artigos, envolvendo 44 instituições sediadas no Brasil e em seis outros países. Os artigos publicados investigaram as principais atividades antrópicas e seus impactos sobre a diversidade de peixes, com foco especial na regulação dos rios, mineração, mudanças no uso do solo, aquicultura e pesca. Os estudos forneceram evidências sobre a perda de diversidade de peixes na região Neotropical, incluindo eventos de mortandade, alterações demográficas, contaminação, mudanças na estrutura das assembleias, perda de diversidade taxonômica e funcional, além da degradação de funções e serviços ecossistêmicos, e falta de ações efetivas de proteção e conservação. Os estudos foram conduzidos em rios, riachos, lagos e reservatórios de diferentes sistemas Neotropicais. Os estudos publicados neste SI representam uma amostra relevante da atual situação dos peixes de água doce na região Neotropical, reforçando a necessidade de revisão das políticas ambientais, ações de manejo e conservação, e prioridades socioeconômicas.(AU)

Land-use changes affect the functional structure of stream fish assemblages in the Brazilian Savanna

We investigated the mechanisms involved in the relationship between land-use changes and aquatic biodiversity, using stream fish assemblages of the Brazilian Savanna (i.e., Cerrado) as a study model. We tested the prediction that landscape degradation would decrease environmental heterogeneity and change predominant physical-habitat types, which in turn would decrease the functional diversity and alter the functional identity of fish assemblages. We sampled fish from 40 streams in the Upper Paraná River basin, and assessed catchment and instream conditions. We then conducted an ecomorphological analysis to functionally characterize all species (36) and quantify different facets of the functional structure of assemblages. We detected multiple pathways of the impacts from landscape changes on the fish assemblages. Catchment degradation reduced the stream-bed complexity and the heterogeneity of canopy shading, decreasing assemblage functional specialization and divergence. Landscape changes also reduced the water volume and the amount of large rocks in streams, resulting in decreased abundances of species with large bodies and with morphological traits that favor swimming in the water column. We conclude that land-use intensification caused significant changes in aquatic biodiversity in the Cerrado, reinforcing the need to pay special attention to this global hotspot.(AU)

Investigamos os mecanismos envolvidos na relação entre mudanças de uso da terra e biodiversidade aquática, utilizando a ictiofauna de riachos do Cerrado como modelo de estudo. Testamos a predição de que a degradação da paisagem reduz a heterogeneidade ambiental e muda os tipos predominantes de habitat, por sua vez, diminuindo a diversidade e alterando a identidade funcional de comunidades de peixes. Amostramos 40 riachos da bacia do Alto Rio Paraná, e avaliamos as condições da drenagem e do habitat físico local. Em seguida, conduzimos uma análise ecomorfológica para caracterizar funcionalmente todas as espécies (36) e quantificar diferentes facetas da estrutura funcional das comunidades. Detectamos múltiplos caminhos de impacto das alterações da paisagem sobre a ictiofauna. A degradação das bacias de drenagem reduziu complexidade do leito e heterogeneidade no sombreamento pelo dossel, diminuindo especialização e divergência funcional das comunidades. Alterações na paisagem também reduziram volume de água e quantidade de pedras grandes nos riachos, resultando em diminuição na abundância de espécies de maior porte e com atributos morfológicos que favorecem a natação na coluna d'água. Concluímos que a intensificação dos usos da terra causa alterações significativas para a biodiversidade aquática no Cerrado, reforçando a necessidade de especial atenção a este hotspot global.(AU)

Efeito do envelhecimento hidrotérmico e mecânico na performance à fadiga de zircônias de alta translucidez / Effect of hydrothermal and mechanical aging on the fatigue performance of high-translucency zirconias

O objetivo deste trabalho foi avaliar a resistência à fadiga e ciclos até a falha de 3 zircônias odontológicas após envelhecimento hidrotérmico isolado e um novo protocolo alternado. Discos de zircônia "Y"Z T (VITA), INCORIS "T"ZI (Dentsply Sirona) e "K"ATANA UTML (Noritake Kuraray) (N=135) ­ 1ª, 2ª e 3ª gerações, respectivamente ­, foram divididos em 9 grupos (n=15), com 3 tratamentos para cada zircônia: CF ­ Controle, somente com fadiga mecânica; EF ­ Envelhecido em reator hidrotérmico a 134 ºC por 20 h + Fadiga; EFA: 4 passos de envelhecimentos de 5h alternados com fadiga. O teste de fadiga em flexão biaxial foi realizado com configuração de pistão sob 3 esferas, utilizando o método step-stress (carga inicial: 100 Mpa, step: 50 MPa/10.000 ciclos, frequência: 20 Hz). Os dados foram analisados através de teste Kaplan-Meir e Mantel-Cox com α=0,05, além da análise de Weibull. Discos fraturados foram analisados em estereomicroscópio, Microscopia Eletrônica de Varredura (MEV) e Difratômetro de Raios-X (DRX). O envelhecimento isolado com fadiga aumentou a resistência do grupo TEF (810 ± 76 MPa), enquanto diminuiu a do YEF (516 ± 38 MPa), o protocolo alternado aumentou a resistência apenas para a YZ T (730 ± 59 MPa). A KATANA UMTL não apresentou diferenças para ambos os tratamentos. Igualmente, foi a única a não sofrer transformação de fase T-M. O grupo TEF apresentou maior taxa sobrevivência à fadiga (147,000.00 ciclos). A origem de fratura para todos os espécimes deu-se no lado de tração em defeitos pré-existentes. Zircônias de 2ª geração possuem melhor comportamento mecânico e longevidade pós-envelhecimento e fadiga. Embora seja menos resistente, a KATANA UTML não sofreu degradação

This study aimed to evaluate the fatigue strength and cycles for failure of 3 dental zirconias after isolated and a novel hydrothermal and mechanical fatigue cycling aging protocol. "Y"Z T (VITA), INCORIS "T"ZI (Dentsply Sirona) and "K"ATANA UTML (Noritake Kuraray) zirconia discs (N=135), were divided into 9 groups (n=15), according to 3 proposed treatments for each zirconia: CF (control ­ only mechanical fatigue cycling); AF (aging in hydrothermal reactor at 134°C for 20 h + mechanical fatigue cycling ); AFA (Alternating protocol: 4 steps of 5 h of hydrothermal aging intercalated with mechanical fatigue cycling). Mechanical fatigue aging was performed according to the step stress approach through biaxial flexural setup (piston-on-3-balls, initial strength: 100 MPa, step: 50 MPa/ci000, frequency: 20 Hz) until failure. Data were analyzed using KaplanMeier and Mantel-Cox test (α=0.05), in addition to Weibull analysis. Fractured discs were analyzed in stereomicroscope, Scanning Electron Microscopy and XRay Diffraction. Continuous hydrothermal and mechanical fatigue cycling decreased the fatigue strength of YAF group (516 ± 38 MPa), while the alternating protocol increased it (730 ± 59 MPa). KATANA UTML showed no differences for both treatments and did not undergo T-M phase transformation. The TAF group showed the highest fatigue strength (810 ± 76 MPa) and cycles for failure (147,000.00 cycles). The fracture origin for all specimens was on the tensile side in pre-existing defects. INCORIS TZI zirconia have higher fatigue strength after hydrothermal and mechanical fatigue aging. Although less resistant, KATANA UTML did not suffer chemical degradation

Destoxificação e perfil nutricional da torta de mamona destoxificada por diferentes soluções alcalinas / [Detoxification and nutritional profile of the detoxified castor by different alkaline solutions]

Objetivou-se avaliar a destoxificação da torta de mamona bruta (TMB), por meio de dois produtos alcalinos em diferentes concentrações, e seus efeitos sobre a composição química, a degradabilidade in situ da MS e o fracionamento de proteínas. Utilizou-se o hidróxido de cálcio [Ca(OH)2] e o hidróxido de sódio (NaOH) em duas concentrações (60 e 90 gramas), diluídos em quatro quantidades de água (1.000; 1.500; 2.000 e 2.500mL de água por quilo de TMB). Observou-se que, das diferentes concentrações utilizadas, somente a utilização de 90 e 60 gramas de Ca(OH)2 e NaOH, respectivamente, conseguiu destoxificar 100% da TMB, ambas diluídas em 2.000mL de água. Por outro lado, ao avaliar o tempo mínimo de contato dos reagentes com a TMB para uma máxima destoxificação, observou-se que três horas de contato é o tempo necessário para os reagentes diminuírem em 100% as proteínas citotóxicas, além de não deixar atividade hemaglutinante nesse material. A destoxificação com o NaOH proporcionou maior degradação das proteínas solúveis e da matéria seca, favorecendo a disponibilização do nitrogênio não proteico, estando sua aplicação em escala industrial na dependência de estudos sobre viabilidade operacional e econômica.(AU)

This study aimed to evaluate the detoxification of crude castor (DCC) through two alkaline products in different concentrations and their effects on the chemical composition, in situ degradability of DM and the fractionation of proteins. We used the calcium hydroxide [Ca(OH)2] and sodium hydroxide (NaOH) in two concentrations (60 and 90 grams) diluted in 4 quantities of water (1,000; 1,500; 2,000 and 2,500ml of water per kilo of DCC). It was observed that in the different concentrations used, only the use of 90 and 60 grams of Ca(OH)2 and NaOH, respectively managed to detoxify 100% of the DCC, both diluted in 2,000ml of water. On the other hand, when assessing the minimum time of contact of the reagents with the DCC for maximum detoxification, it was observed that with three hours of contact is the time required for the reagents decrease in 100% of the cytotoxic proteins, in addition to not leave haemagglutinating activity in this material. The detoxification with NaOH provided greater degradation of soluble proteins and degradation of dry matter, favoring the provision of non-protein nitrogen, while its application on an industrial scale is in the dependence of studies on operational feasibility and cost.(AU)

Forced degradation studies and stability-indicating liquid chromatography method for determination of tirofiban hydrochloride and synthetic impurities / Estudo da degradação forçada e método indicativo da estabilidade por cromatografía líquida para determinação de cloridrato de tirofibana e impurezas sintéticas

SUMMARY This study aimed to develop and validate a stability-indicating liquid chromatography method for the determination of tirofiban hydrochloride and two synthetic impurities (impurity A and impurity C). The method utilizes a RP-18 column (250 mm x 4.6 mm; 5 µm) with the PDA detector for quantitation. A mixture of triethylamine 0.1% (acidified to pH 5.5 with phosphoric acid) and acetonitrile was used as the mobile phase at a flow rate of 1 mL min-1 with gradient elution. The method presented satisfactory linearity, precision, accuracy and robustness, as well as low limits of detection and quantification, which demonstrate sensitivity in the determination of tirofiban and impurities A and C. It was selective for the determination of the drug and impurities analysed, without interference of the degradation products generated under forced conditions, demonstrating the stability-indicating capacity of the proposed method. Tirofiban showed to be practically stable to oxidative (30% H2O2 for 24 h) and thermal (75 °C for 24 h) conditions, but presented degradation to UVA light and acid hydrolysis, obeying the first order kinetics for both. In this way, it can be used as a stability-indicating method in the quality control of the raw material of tirofiban hydrochloride, as well as of the finished product. The obtained results demonstrate the importance of deepening the studies in this area, to guarantee the quality of commercialized pharmaceutical products.

RESUMO Este estudo teve como objetivo desenvolver e validar método indicativo da estabilidade por cromatografía líquida para determinação de cloridrato de tirofibana e duas impurezas de síntese (impureza A e impureza C). O método utilizou coluna de fase reversa RP-18 (250 mm x 4,6 mm; 5 µm) e detector PDA para quantificação. A fase móvel foi composta por uma mistura de trietilamina 0,1% (acidificada com ácido fosfórico para pH 5,5) e acetonitrila, à vazão de 1 mL/min, no modo gradiente. O método apresentou linearidade, precisão, exatidão, robustez, bem como baixos limites de detecção e quantificação, demonstrando sensibilidade na determinação da tirofibana e impurezas A e C. O método apresentou seletividade na determinação do fármaco e das impurezas, sem interferência dos produtos de degradação gerados na degradação forçada da tirofibana, demonstrando sua capacidade indicativa de estabilidade. O fármaco apresentou-se estável a oxidação (H2O2 30% por 24 h) e a degradação térmica (75 °C por 24 h), mas degradou frente à luz UVA e hidrolise ácida, obedecendo cinética de primeira ordem para ambas. Dessa forma, pode ser utilizado como um método indicativo de estabilidade no controle de qualidade da matéria -prima do cloridrato de tirofibana, bem como no produto acabado. Os resultados obtidos demonstram a importância de aprofundar os estudos na área, com intuito de garantir a qualidade dos produtos farmacêuticos comercializados.